鳃霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 鳃霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Branchiomyces Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3270 |
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对鳃霉属通用基因高度保守区域设计特异性引物。在反应体系中，若存在鳃霉属核酸模板，PCR扩增过程中SYBR Green染料与双链DNA结合并释放荧光信号，通过实时监测荧光强度变化，实现对目标核酸的定性和定量分析。
试剂组成
鳃霉属通用扩增液（50μL×1管）
其他配套试剂（如阳性对照、阴性对照、反应缓冲液等，具体以实际包装为准）。
实验操作规范
样本准备：提取待测样本核酸，确保纯度符合PCR要求（A260/A280比值1.8-2.0）。
试剂平衡：使用前将试剂盒置于室温平衡1小时，避免反复冻融。
反应体系配置：
按说明书比例混合扩增液、模板DNA及缓冲液，总体积20μL/反应。
每份样本建议设置复孔以提高数据可靠性。
PCR程序：
预变性：95℃ 2分钟；
扩增循环：95℃ 15秒→60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环；
熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃递增。
结果判读：
通过Ct值（阈值循环数）定量分析，熔解曲线验证扩增特异性。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免交叉污染。
移液精度误差需控制在2%以内，建议使用校准后的移液器。
荧光信号采集阶段避免开启仪器盖，防止光干扰。
若结果异常，建议重复实验或通过其他方法（如测序）验证。
适用仪器
兼容主流实时荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等）。
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