人含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)ELISA试剂盒
产品简介:
人含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)ELISA试剂盒用于定量检测人体样本(如血清、血浆、细胞培养上清液等)中的NLRP3蛋白水平。NLRP3是炎症小体的关键成分,参与调控炎症反应,在多种疾病(如自身免疫性疾病、代谢性疾病、神经退行性疾病等)中发挥重要作用。
英文名称 | Human NLRP3 ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A114932 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.156ng/mL | 检测范围 | 0.312ng/mL-20ng/mL |
检测原理
双抗体夹心法ELISA:微孔板预包被抗NLRP3抗体,样本中的NLRP3与生物素化的检测抗体结合,再与HRP标记的链霉亲和素反应,加入TMB底物后显色,颜色深浅与NLRP3浓度呈正相关,酶标仪在450 nm波长处读数。
主要组成
预包被酶标板(96/48孔)
NLRP3标准品(多个浓度梯度)
生物素化检测抗体
HRP标记链霉亲和素
底物溶液(TMB)、终止液(硫酸)
洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂
检测流程
加样:标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素
洗涤:每孔加满洗涤液,重复5次
显色:加入底物溶液,避光反应10-15分钟
终止:加入终止液
读数:酶标仪450 nm波长测定OD值
性能指标
检测范围:通常为0.312-20 ng/mL(具体以说明书为准)
灵敏度:最小可检测剂量小于等于0.125 ng/mL
特异性:仅与人类NLRP3反应,不与其他NLR家族成员显著交叉反应
重复性:板内变异系数≤10%,板间变异系数≤15%
临床与研究意义
自身免疫性疾病研究:NLRP3炎症小体在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病中过度激活,促进炎症反应
代谢性疾病研究:NLRP3与2型糖尿病、肥胖等代谢性疾病相关,参与胰岛素抵抗和慢性炎症过程。
神经退行性疾病研究:NLRP3在阿尔茨海默病、帕金森病等疾病中促进神经炎症,加剧神经元损伤。
心血管疾病研究:NLRP3与动脉粥样硬化、心肌梗死等疾病相关,参与斑块形成和炎症反应
样本要求
血清/血浆:避免溶血和反复冻融。
其他样本:如细胞培养上清液,需经适当处理和稀释。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存,有效期一般为6个月。
实验前平衡至室温,严格按照说明书操作。
建议设空白对照、标准曲线和样本复孔,确保结果准确可靠。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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