人甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒
一、检测原理与技术特性:
双抗体夹心ELISA技术
捕获抗体：微孔板预包被抗PTH（1-84）单抗，特异性结合完整PTH分子（检测范围5–2500 pg/mL）。
信号放大：生物素标记的二抗与链霉亲和素-HRP联用，超敏TMB显色（灵敏度达1.5 pg/mL）。
抗干扰设计：含EDTA（抑制PTH降解）和异嗜性抗体阻断剂，避免与PTHrP交叉反应（＜0.01%）。
英文名称 | Human PTH ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A098659 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 6.175pg/mL | 检测范围 | 12.35pg/mL-1,000pg/mL |
动态范围优化
覆盖生理水平（健康人血清10–65 pg/mL）至病理浓度（如肾性骨营养不良患者＞500 pg/mL）。
核心组分与样本要求
组分 技术参数
预包被96孔板 抗PTH（1-34）表位抗体固定化（批间差＜7%）
标准品 重组人PTH（1-84）（0、20、50、100、250、500、1000、2500 pg/mL）
适用样本 血清（首选，避免溶血）、血浆（EDTA抗凝），2小时内分离
特殊添加剂 含蛋白酶抑制剂（如AEBSF），2–8℃保存有效期18个月
临床应用与科研价值
钙磷代谢疾病诊断
原发性甲旁亢：PTH＞100 pg/mL伴高血钙（需联合血钙检测）。
继发性甲旁亢：慢性肾病（CKD）患者PTH水平与骨病进展相关（目标范围：CKD3-4期150–300 pg/mL）。
手术监测
甲状旁腺切除术后15分钟内PTH下降＞50%提示手术成功。
研究应用
PTH（1-34）片段（特立帕肽）治疗骨质疏松的疗效评估。
操作规范与质控要点
样本处理
采集后立即冰浴，30分钟内离心（避免PTH降解）。
避免使用肝素抗凝血浆（干扰钙离子结合）。
实验关键
温育条件：37℃避光45分钟，严格控时（±2分钟）。
洗涤液需含0.05% Tween-20（降低非特异性结合）。
质控标准
每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜8%）。
性能比较与注意事项
特性 优势 局限性
灵敏度 可检测1.5 pg/mL微量PTH 无法区分完整PTH与降解片段（如7-84）
特异性 与PTHrP交叉反应＜0.01% 样本稳定性差（需严格预处理）
通量 适配全自动平台（如Tecan Freedom EVO） 高脂血样本需超速离心
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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