产品简介：
产品名称 | 人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human IGFBP-6 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A100532 |
目标分子：胰岛素样生长因子结合蛋白6（Insulin-like Growth Factor Binding Protein 6, IGFBP-6）是IGFBP家族关键成员，分子量约28-34kDa，以高亲和力特异性结合IGF-2为特征。
生物学特性：
结构特征：含保守的N/C端结构域，具有独特的肝素结合区
主要来源：成骨细胞、血管内皮细胞、多种肿瘤细胞
核心功能：
特异性调控IGF-2生物活性（比对IGF-1强100倍）
抑制血管生成和肿瘤转移
参与骨代谢平衡
调节细胞凋亡过程
临床意义：
肿瘤预后标志物（乳腺癌、结肠癌、神经母细胞瘤）
骨质疏松症研究
血管生成异常疾病评估
生长发育监测（儿童IGF系统功能）
2. 检测原理
双抗体夹心ELISA法：
捕获抗体：微孔板包被抗IGFBP-6单抗（靶向N端表位）
样本反应：IGFBP-6与固相抗体特异性结合
检测抗体：加入生物素标记的抗IGFBP-6多抗（靶向C端）
信号放大：链霉亲和素-HRP复合物结合
显色系统：TMB显色，450nm/630nm双波长检测
3. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件 关键说明
预包被微孔板 96T（可拆） 2-8℃（带干燥剂） 避免潮湿
IGFBP-6标准品 0.25-16 ng/mL -20℃ 冻干粉需精密复溶
生物素标记抗体 1.0mL -20℃（避光） 避免反复冻融
链霉亲和素-HRP 1.0mL -20℃（避光） 使用前离心
样本稀释液 25mL 2-8℃ 含蛋白稳定剂
TMB底物 12mL 2-8℃（避光） 开封后1月内有效
终止液 12mL 室温 强酸注意防护
20×洗涤液 50mL 室温 需1:19稀释
4. 样本要求
适用样本类型：
血清（推荐无添加剂采血管）
血浆（EDTA抗凝优于肝素）
细胞培养上清（离心12000×g 10分钟）
骨组织匀浆（需特殊裂解处理）
样本处理规范：
采集后立即冰浴，1小时内离心（1500×g，15分钟，4℃）
分装储存于-80℃（冻融≤2次）
检测前室温平衡，避免震荡
粘稠样本（如骨髓液）需注明
检测流程
标准操作程序：
标准曲线制备：
梯度稀释：0.25、0.5、1、2、4、8、16 ng/mL
每孔100μL，建议复孔检测
关键步骤参数：
孵育条件：
样本孵育：37℃ 120±5分钟
检测抗体：37℃ 60±3分钟
洗涤程序：300μL/孔，浸泡30秒，洗5次
显色控制：TMB避光反应20±1分钟
质量控制要求：
空白孔OD值<0.1
标准曲线R2≥0.98
质控品回收率85-115%
公司正在出售的产品：
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常见问题与避坑指南：
环节 风险点 避坑建议
试剂使用 混用 严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分（如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗），这会导致反应体系崩溃。
终止反应 顺序 加入终止液后，溶液由蓝变黄。此时应尽快读数，因为颜色可能会随时间轻微变化。
保存 剩余板条 未用完的酶标板条，需立即密封，放入自封袋中并加干燥剂，保存于 2-8℃，避免受潮和反复冻融。
环境 污染 避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质，它们会破坏酶的活性，导致实验失败。
建议：
在购买前，务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高（如CR0.1%），
但在你的实际样本中出现了大量假阳性，那可能需要优化洗涤步骤，或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。
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