支链/直链/总淀粉含量（酶法）-分光法50T
产品简介：
谷物淀粉中的直链淀粉最常见的测定方法是对直链淀粉的碘结合能力进行电位法、电流法或比色法测量，从而形成直链淀粉-碘包合复合物。然而，这些方法存在不确定性。支链淀粉-碘复合物也会形成，它们会降低通过非比色法测量的游离碘的浓度，并且可能会在与比色法中的直链淀粉-碘复合物相似的波长处吸收。
本试剂盒利用伴刀豆球蛋白A只与支链淀粉结合而不与直链淀粉结合的特性，使其分离，再用仅水解淀粉的酶复合物使淀粉水解为葡萄糖，通过检测葡萄糖含量得到直链、支链和总淀粉的含量。
保存条件：
未配制前在规定存储条件下6个月内有效，配制使用后在规定存储条件下3个月内有效。（各组分详细储存条件见瓶身）
1.所需的仪器和用品：
可见分光光度计、10mm玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液器、冰、二甲基亚砜（DMSO,分析级）、乙醇、乙酸和蒸馏水
2.需配试剂：
乙酸钠缓冲液（100mM，pH4.5）：
向900ml蒸馏水中添加5.9ml冰醋酸，通过添加NaOH溶液将pH值调节至pH4.5，加入0.2g叠氮化钠（防腐剂，若没有该试剂可不添加），调节体积至1L。
浓缩ConA溶剂（600mM，pH6.4醋酸钠缓冲液）：
称取49.2g无水乙酸钠，175.5gNaCl，0.5g二水合CaCl2，0.7g六水合MgCl2和0.7g四水合MnCl2，后加入900ml蒸馏水。逐滴加入冰醋酸，调节pH至6.4（不能低于6.4，否则重新配置），然后用蒸馏水将其定容至1L。
ConA溶剂（工作浓度）：取30ml浓缩ConA溶剂用蒸馏水将其定容（比例为3：7）至100ml，现用现配。
淀粉含量测定：
1.准确称量淀粉或面粉样品20±0.2mg，放入10ml离心管中；
2.向离心管中加入1mlDMSO，同时在涡旋仪上低速轻轻搅拌；之后盖上管子，在100℃沸水浴中加热，直到样品完全分散（约1min）；
注意：需确保没有凝胶状的淀粉块存在
3.在涡旋仪上高速搅拌离心管中的内容物，并将离心管放入水浴锅中100℃水浴15min，期间使用涡旋仪混匀3~5次。
4.加热结束后立即对样品进行涡旋并加入2ml乙醇（95%(v/v)），继续在涡旋仪上持续搅拌，混合均匀后再加入4ml乙醇（95%(v/v)），盖上管子并倒置使样品于液体充分混合15min；
注意：倒置静置时管中会形成淀粉沉淀，为正常现象
5.将离心管以2,000xg离心5min，弃去上清液，倒置在纸巾上沥干10min，确保所有的乙醇都已排空，将沉淀用于在随后的直链淀粉和总淀粉测定中。
6.将含有淀粉样品沉淀的离心管放置在涡旋仪上轻轻涡旋同时加入2mlDMSO并立即涡旋混合，之后将离心管放入水浴锅中100℃沸水浴15min，并不时搅拌，防止出现凝胶状的块状物；
7.将试管从沸水浴中取出后冷却至室温，加入4mlConA溶剂，充分混合，然后将试管内容物定量转移（用ConA溶剂反复洗涤）到25ml容量瓶中，并定容至25ml，即为待测液。注：若是谷物样本，第6步得到的溶液中有杂质，需待自然冷却5min后于3000rpm室温（低于10℃会冻结）离心5min，上清液备用；若是纯淀粉样本，第6步得到的溶液呈澄清状，不需离心自然冷却即可。
注意：样品应在2小时内进行检测。
关键字： 支链-直链-总淀粉含量试剂盒;
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