人胰脂肪酶(PL)ELISA试剂盒
产品简介:
1. 基本介绍
目标分子：胰脂肪酶（Pancreatic Lipase, PL）是胰腺分泌的关键消化酶，分子量约48-50kDa，属于羧酸酯水解酶家族，特异性水解甘油三酯为甘油和游离脂肪酸。
生物学特性：
分子特征：含449个氨基酸，活性中心为Ser-His-Asp三联体
分泌调控：受胆囊收缩素（CCK）和进食刺激调节
英文名称 | Human PL ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A097018 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.3125ng/mL | 检测范围 | 0.625ng/mL-40ng/mL |
生理功能：
肠道脂肪消化的核心酶
维持脂溶性维生素吸收
参与胆固醇代谢调节
临床意义：
急性胰腺炎诊断金标准（敏感性85-100%）
慢性胰腺炎进展监测
胰腺手术后功能评估
胰管梗阻性疾病筛查
2. 检测原理
双抗体夹心ELISA法：
捕获抗体：微孔板包被抗PL单克隆抗体（识别独特表位）
样本反应：PL与固相抗体特异性结合
检测抗体：加入HRP标记的抗PL多克隆抗体
显色系统：TMB显色，450nm主波长/630nm参比波长检测
3. 试剂盒组成
组分 规格 保存条件 关键说明
预包被微孔板 96T（可拆） 2-8℃（带干燥剂） 避免受潮
PL标准品 10-500 U/L（冻干粉） -20℃ 需精密复溶
酶标抗体 1.2mL -20℃（避光） 避免反复冻融
样本稀释液 20mL 2-8℃ 含蛋白酶抑制剂
TMB底物 10mL 2-8℃（避光） 开封后1月有效
终止液 10mL 室温 强酸注意防护
20×洗涤液 50mL 室温 需1:19稀释使用
封板膜 5张 室温 防止蒸发污染
4. 样本要求
适用样本类型：
血清（推荐无抗凝管）
血浆（肝素抗凝，避免EDTA）
腹水（需注明临床诊断）
样本处理规范：
采集后立即冰浴，1小时内离心（1500×g，15分钟，4℃）
分离后2小时内检测或-80℃保存（冻融≤2次）
避免使用溶血样本（血红蛋白>0.5g/dL）
脂血样本需备注（甘油三酯>500mg/dL可能干扰）
5. 检测流程
标准操作程序：
标准曲线制备：
梯度稀释：10、50、100、200、300、500 U/L
每孔100μL，建议复孔检测
关键步骤参数：
孵育条件：
样本孵育：37℃ 90±5分钟
酶标抗体：37℃ 60±3分钟
洗涤程序：300μL/孔，浸泡30秒，洗5次
显色控制：TMB避光反应15±1分钟
质量控制：
空白孔OD值<0.08
标准曲线R2≥0.99
质控品应在预期值±15%内
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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