葡萄孢菌染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专为检测葡萄孢菌（Botrytis cinerea）设计，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。其核心优势包括高特异性、灵敏度和操作便捷性，可快速检测样品中低至几百拷贝的靶序列。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高特异性：引物基于葡萄孢菌保守序列设计，无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式操作避免扩增产物污染。

稳定可靠：50次20μL反应体系，满足批量检测需求。

规格及组分

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃ |

| 葡萄孢菌PCR引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃ |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃（单独存放） |

| 使用手册 | 1份 | 常温 |

运输与保存

运输：低温运输（冰袋或干冰）。

保存：-20℃避光保存，有效期12个月。

自备试剂

DNA提取试剂（用于样本制备）。

10×ROX校正染料（根据机型需求选用）。

使用方法

1. 阳性对照稀释（示例：10²~10⁷拷贝/μL梯度）

标记6管，分别加入45 μL稀释液。

梯度稀释：取5 μL阳性对照逐级稀释，涡旋混匀，冰上暂存。

2. 样本DNA制备

按标准方法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

3. PCR反应体系

按20 μL体系配制：10 μL 2×Mix、1 μL引物混合物、1 μL模板、8 μL无核酸酶水。

4. 上机检测

按仪器说明书设置程序（推荐：95℃ 3min预变性；95℃ 15s→60℃ 60s，40循环）。

数据分析

定量检测：以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40或无扩增曲线。

阳性：Ct≤35且曲线典型。

可疑（35<Ct<40）：需复测确认。

注意事项

阳性对照需在独立区域操作，避免污染。

反应体系需避光操作，防止荧光淬灭。

本产品仅限科研使用。

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