不动杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

不动杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于不动杆菌属的快速、高灵敏度检测。通过优化设计的引物和探针靶向高度保守序列，确保特异性强，避免与其他病原体RNA交叉反应。适用于科研用途（不可用于临床诊断）。

技术原理

荧光定量PCR：在PCR反应体系中加入荧光探针，通过实时监测荧光信号扩增曲线，实现核酸定量检测。

反转录（RT）：若检测对象为RNA，需先通过逆转录酶合成cDNA，再进行PCR扩增。

试剂盒组成

预混液：含dNTPs、Taq DNA聚合酶、缓冲液等

引物探针混合液：针对不动杆菌属保守序列设计

阳性对照：不动杆菌属标准品（用于质控）

阴性对照：无核酸酶水（排除污染干扰）

操作步骤

样本处理：

组织样本：液氮研磨后加裂解液提取RNA/DNA。

全血样本：红细胞裂解后提取核酸。

反应体系配制（20μL/反应）：

模板DNA/RNA 2μL

预混液10μL

引物探针混合液2μL

无核酸酶水补至20μL

PCR程序：

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |

| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |

| 退火 | 55-60℃* | 20 sec | |

| 延伸 | 72℃ | 30 sec | |

| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |

*注：退火温度需根据引物Tm值调整。

性能参数

灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的靶标。

特异性：不与常见病原体核酸发生交叉反应。

稳定性：-20℃保存有效期1年，避免反复冻融。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，防止污染。

阳性对照与待测样本需分区域处理，避免假阳性。

若出现无扩增信号，需检查试剂活性或重新优化反应条件。

运输与储存

运输条件：低温（-20℃）运输。

保存条件：-20℃避光保存，开封后建议分装使用。

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