口腔支原体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 口腔支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycoplasma orale Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3447 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于口腔支原体（Mycoplasma spp.）的快速、高灵敏度检测，适用于科研用途。试剂盒采用优化引物及反应体系，可实现对口腔支原体DNA的定性和定量分析，灵敏度达几百拷贝/反应，特异性强，与相近病原体无交叉反应。
产品组成
预混PCR反应液：含热启动Taq酶、dNTPs、荧光染料及缓冲体系（20μL/反应）。
阳性对照：已知浓度的口腔支原体DNA（1×10^8拷贝/μL）。
阴性对照：无核酸酶水。
ROX参比染料（可选）：用于校正加样误差（需根据机型选择）。
技术参数
检测范围：定性或定量检测，定量线性范围≥5个数量级。
灵敏度：最低检出限2-4个基因组/反应。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融。
规格：50次反应（20μL体系/次）。
操作步骤
1. 标准曲线制备
梯度稀释阳性对照（10^7~10^2拷贝/μL），依次加入PCR管中。
每管加入45μL稀释液，震荡混匀后冰上备用。
2. 样品DNA提取
使用兼容的核酸纯化方法制备待测样本DNA，建议设置阴/阳性对照。
3. qPCR反应体系（20μL）
按比例混合预混液、模板DNA（或标准品）及ROX染料（若需）。
程序设置：预变性95℃ 2分钟→（95℃ 15秒→60℃ 30秒）×40循环。
4. 数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：通过Ct值及扩增曲线判定阳性/阴性。
注意事项
自备试剂：DNA模板、无核酸酶水、移液器及耗材（建议使用带芯枪头）。
污染控制：分设样品制备区与PCR区，避免气溶胶污染。
质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照，排除假阴性或污染。
运输与存储
低温（-20℃）运输，保存于-20℃避光环境，开封后避免反复冻融。
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