火鸡支原体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 火鸡支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycoplasma meleagridis Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3451 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供病毒样品DNA模板,操作简便。
高特异性:引物基于火鸡支原体保守序列设计,与其他微生物无交叉反应。
高灵敏度:检测下限可达数百拷贝/反应。
一管式检测:采用封闭式荧光定量PCR体系,避免扩增后污染。
配套完整:含阳性对照(无传染性DNA片段),便于区分假阴性结果。
定量范围广:线性范围覆盖5个数量级(10^2~10^7拷贝/μL)。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 | 包装特征 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL | 棕色管 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 火鸡支原体PCR引物混合液 | 100 μL | 白盖 |
| 火鸡支原体PCR阳性对照 | 50 μL | 独立管 |
操作步骤
标准曲线制备(以10^2~10^7拷贝/μL梯度为例)
标记6支离心管(编号7至2),每管加入45 μL模板稀释液。
在7号管中加入5 μL阳性对照(1×10^8拷贝/μL),震荡混匀,得到10^7拷贝/μL的标准品。依次10倍稀释至10^2拷贝/μL。
稀释操作需在独立区域进行,避免污染。
PCR反应体系(20μL/反应)
| 组分 | 体积 |
| 2×qPCR MagicMix | 10 μL |
| 引物混合液 | 2 μL |
| 模板DNA | 2 μL |
| ddH₂O | 补至20 μL |
扩增程序
预变性:95℃ 3分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
溶解曲线分析:按仪器默认设置执行。
注意事项
阳性对照为DNA片段,不含活体病原,无需生物安全顾虑。
建议使用带滤芯枪头操作,避免气溶胶污染。
数据解读需结合标准曲线,确保定量准确性。
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关键字: 火鸡支原体;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;