产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术（如SYBR Green I），专用于检测长鼻分咽线虫（Dispharynx nasuta）的特异性基因序列（如ITS区域或线粒体COI基因）。通过实时监测荧光信号强度，结合标准曲线实现病原体的定性与定量分析，适用于动物肠道组织、粪便、血液等样本的科研检测。
产品名称 | 长鼻分咽线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Longistrongylus elongatus Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3357 |
核心参数
规格：50次反应（20μL体系/次）
灵敏度：≤100拷贝/反应
特异性：针对长鼻分咽线虫保守序列设计，与其他线虫（如蛔虫、钩虫）无交叉反应。
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
适用仪器：ABI 7500、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
试剂盒组成
| 成分 | 规格（50次） | 功能说明 |
| 2×qPCR预混液 | 500μL | 含DNA聚合酶、dNTPs、SYBR Green I染料 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL | 样本及对照稀释 |
| 长鼻分咽线虫引物混合液 | 100μL | 特异性扩增目标基因 |
| 阳性对照（DNA片段） | 50μL | 定量标准品（1×10⁸拷贝/μL） |
| 阴性对照（超纯水） | 1mL | 污染监控 |
操作流程
样本DNA制备
样本类型：肠道组织、粪便等。
提取方法：推荐柱式法提取DNA，确保纯度（A260/A280≈1.8-2.0）。
反应体系配制（冰上操作）
20μL体系：
2×qPCR预混液：10μL
引物混合液：2μL
模板DNA：2μL
超纯水补至20μL。
PCR扩增程序
循环条件：
95℃预变性5min → [95℃变性15s → 60℃退火/延伸45s] ×40循环。
溶解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃采集荧光信号。
结果分析
定量：以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算样本拷贝数。
定性：Ct值≤35且溶解曲线为单一峰判定为阳性。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作时需分区（样本处理、PCR配制、扩增区），避免气溶胶污染。
阳性对照需独立稀释，防止污染其他组分。
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