猪滑液支原体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 猪滑液支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycoplasma hyosynoviae Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3453 |
产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术,专用于检测猪滑液支原体(Mycoplasma hyosynoviae)核酸,具有高灵敏度和特异性,适用于科研用途(不可用于临床诊断)。
产品组成
2×qPCR MagicMix(棕色管,500 μL)
荧光PCR专用模板稀释液(黄盖,1 mL)
猪滑液支原体PCR引物混合物(白盖,100 μL)
阳性对照(红盖,1×10⁸拷贝/μL,50 μL)
使用手册
操作步骤
1. 样品处理(样本处理区)
样本前处理:按规范采集猪滑液样本,避免污染。
DNA提取:使用常规核酸提取试剂盒提取样本DNA。
2. 试剂配制(试剂准备区)
将各组分(除模板)解冻后混匀,短暂离心备用。
按20 μL反应体系配制预混液(含引物、MagicMix等)。
3. 加样(样本处理区)
将模板DNA加入预混液,避免气泡,盖紧管盖。
4. PCR扩增(核酸扩增区)
按以下程序运行荧光定量PCR仪:
预变性:95℃ 5分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(采集荧光信号)
5. 结果分析
定性检测:根据Ct值判定阳性/阴性(需设置阈值)。
定量检测:以阳性对照log值为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线,推算待测样本浓度。
注意事项
严格分区操作(样本处理、试剂配制、扩增),避免交叉污染。
反应液避光保存,使用一次性耗材及专用工作服。
实验后清洁台面(10%次氯酸或75%酒精消毒)。
阳性对照需单独存放,防止污染。
技术参数
灵敏度:可达几百拷贝/反应。
特异性:引物针对猪滑液支原体保守序列设计,无交叉反应。
规格:50次反应(20 μL/次)。
储存与运输
保存于-20℃,避免反复冻融。
运输需干冰或冰袋保温。
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