产品用途
用于溶组织内阿米巴（Entamoeba histolytica）的定性及定量检测，仅限科研使用。
产品名称 | 内阿米巴通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Entamoeba spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3362 |
产品特点
高灵敏度：引物经优化设计，检测限低，可精准识别低拷贝数目标序列。
高特异性：基于高度保守区设计的引物，避免与其他微生物DNA/RNA发生交叉反应。
双功能检测：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
安全对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，避免活体病原扩散风险。
稳定保存：-20℃避光保存，避免反复冻融。
试剂盒组成
反应体系：50次20μL荧光定量PCR反应所需试剂（含预混液、引物、染料等）。
阳性对照：1×10⁸拷贝/μL标准品（无传染性DNA片段）。
稀释液：荧光PCR专用模板稀释液。
操作步骤
1. 标准曲线制备（以6个10倍稀释梯度为例）
标记离心管：编号7至2，分别对应10⁷~10²拷贝/μL浓度梯度。
稀释操作：
向每管加入45 μL稀释液（需使用带芯枪头）。
取5 μL阳性对照（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得到10⁷拷贝/μL标准品。
依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL）。
注意事项：稀释需在独立区域进行，避免污染。
2. PCR反应设置
体系配置：按20μL体系加入模板DNA、预混液及引物。
荧光参数：
染料游离态吸收峰471 nm，结合DNA后吸收峰500 nm，发射峰530 nm。
信号采集建议在复性或延伸阶段。
3. 数据分析
定量检测：以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线，计算待测样本浓度。
定性检测：
阴性对照：Ct≥40；阳性对照：Ct≤30且扩增曲线典型。
样本判定：Ct≤35为阳性，Ct≥40为阴性；35<Ct<40需重复检测。
注意事项
图
安全防护：操作时需穿戴实验服、口罩及一次性手套。
避免污染：分区操作，使用带滤芯枪头。
存储条件：-20℃保存，避免反复冻融。
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关键字： 内阿米巴通用;染料法荧光定量;PCR试剂盒;