检验原理
采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术,针对卡他莫拉菌基因保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程,实现定性或定量分析。
产品名称
卡他莫拉菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Moraxella catarrhalis Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3375
试剂盒组成
扩增液:50μL×1管
反应液:950μL×1管
阳性质控品:50μL×1管(1×10^8拷贝/μL)
阴性质控品:50μL×1管
说明书:1份
注:不同批号组分不可混用。
储存与运输
储存条件:-20℃±5℃避光保存,避免反复冻融(≤7次)。
有效期:12个月。
运输:低温(-20℃)或冰袋(2~8℃)运输。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪,包括:
ABI系列(如7500、StepOnePlus)
Bio-Rad(CFX96)
Roche LightCycler
Eppendorf Mastercycler
样本要求
样本类型:胃液分泌物、呕吐物或培养物(需符合《临床微生物样本采集规范》)。
保存条件:
短期:-20℃
长期:-70℃(≤6个月)
运输:2~8℃冰袋,禁止反复冻融。
操作步骤
1. 标准曲线制备(定量分析需6个梯度稀释,10^7~10^2拷贝/μL)。
2. 样本DNA提取:建议使用无核酸酶污染的纯化试剂。
3. qPCR反应体系:
反应体积:20μL
程序:预变性(95℃, 2min)→ 40循环(95℃ 15s → 60℃ 30s)→ 熔解曲线分析。
结果判读
定性:Ct值≤35且熔解曲线单一峰为阳性。
定量:根据标准曲线计算拷贝数。
注意事项
分区操作(样本处理区、PCR准备区、扩增区)。
使用滤芯吸头避免交叉污染。
阴/阳性质控需同步检测。
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