交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 交链孢霉属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Alternaria spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3474 |
预期用途
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，通过特异性引物和荧光染料（如SYBR Green）对交链孢霉属病原体的保守基因组区域进行扩增检测，适用于环境样本、临床标本或食品中交链孢霉属的定性筛查及疗效评估。
检验原理
染料法原理：SYBR Green等荧光染料可非特异性嵌入双链DNA中，在PCR扩增过程中随产物积累释放荧光信号，通过实时监测荧光强度变化实现靶标核酸的定性与半定量分析。
高特异性：针对交链孢霉属基因组保守序列设计引物，确保检测特异性。
灵敏度：可检测低至单拷贝的靶标分子，扩增效率达10^9–10^10。
试剂盒组成
预混液：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及优化剂（即开即用）。
阳性对照：灭活交链孢霉属cDNA。
阴性对照：无靶标基因组DNA。
荧光染料：SYBR Green或其他等效染料。
注：具体组分可能因批次调整，以实际包装清单为准。
操作步骤
样本制备：按标准方法提取待测样本DNA。
反应体系配制：将模板DNA、预混液、引物及染料按比例混合。
PCR扩增：
程序设置：预变性（95℃, 5min）→ 循环扩增（95℃ 15s, 60℃ 30s, 40个循环）。
荧光信号采集：于60℃延伸阶段读取荧光值。
结果分析：通过扩增曲线和Ct值判定样本中交链孢霉属核酸的存在及相对含量。
性能参数
特异性：不与常见相近真菌（如曲霉、青霉）交叉反应。
灵敏度：检测下限≤10 copies/μL。
重复性：批内/批间变异系数（CV）<5%。
注意事项
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。
实验需在无菌环境下操作，防止污染。
建议使用专用荧光定量PCR仪，确保数据准确性。
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