小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(Cys-C)ELISA试剂盒
实验原理:
英文名称 | Mouse Cys-C ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A115573 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.156ng/mL | 检测范围 | 0.312ng/mL-20ng/mL |
试剂盒采用双抗体夹心法。预先包被Cys-C捕获抗体的微孔板依次加入标准品和待测样本，样本中的Cys-C与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色，颜色深浅与Cys-C浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本中的Cys-C浓度。
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板：用于固相抗体的固定。
标准品：已知浓度的Cys-C溶液，用于绘制标准曲线。
生物素标记的检测抗体：与Cys-C结合。
HRP标记的链霉亲和素：催化显色反应。
显色底物（TMB）：在HRP作用下显色。
终止液：终止显色反应。
洗涤液：用于洗涤未结合的试剂。
样本稀释液：用于稀释待测样本。
检测范围与灵敏度
检测范围：通常为0.156-10ng/mL或15.63-1000pg/mL。
灵敏度：最低检测浓度为12.8pg/mL或9.38pg/mL。
操作步骤
准备试剂和样本：按说明书准备试剂，处理样本。
加样：将标准品和样本加入酶标板孔中。
温育：在指定温度下孵育，使抗体-抗原充分结合。
洗涤：洗去未结合的试剂，减少背景干扰。
加酶标抗体：加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素。
显色：加入TMB底物，避光孵育显色。
终止反应：加入终止液，终止显色。
读数：使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
计算：根据标准曲线计算样本中的Cys-C浓度。
注意事项
样本处理：血清、血浆需离心处理，避免反复冻融。
试剂保存：试剂盒需按说明书保存，避免失效。
操作规范：使用一次性吸头，避免交叉污染；严格按步骤操作，确保结果准确性。
适用范围
本试剂盒适用于科研领域，用于检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及相关生物液体中的Cys-C浓度，不适用于临床诊断。
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ELISA试剂盒的主要优点：ELISA之所以被广泛应用，主要归功于以下几个核心优势：
灵敏度高（抓得准）：
它利用酶的催化放大作用，能将微弱的信号放大，因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质（甚至达到皮克级 pg/mL）。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质，它也能“捕捉”到。
特异性强（瞄得准）：
基于抗原-抗体的特异性结合原理，试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应，很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率，结果准确可靠。
操作简便且快速：
相比于一些复杂的仪器分析方法，ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件，按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广：
它通常采用96孔板或48孔板，一次实验可以同时处理几十个样本，非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外，它不仅能测蛋白，还能测抗体、激素、药物残留甚至农药，应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定：
不像放射免疫法那样使用放射性同位素，ELISA使用的是酶标记，对人体和环境无辐射危害，且试剂保存时间较长。
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