病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Virus Dye-based qRT-PCR Kit (通用型) |
规格 | 50T | 货号 | PR3585 |
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法，专为病毒RNA的一步法荧光定量RT-PCR检测设计。通过整合反转录（RT）与实时定量PCR（qPCR）于同一反应体系，可高效完成病毒核酸的灵敏检测与定量分析，适用于临床样本、环境监测及科研领域。
核心组分
2×预混缓冲液：含优化反应缓冲体系、dNTPs及SYBR Green I染料。
酶混合液：包含耐热反转录酶（如Hifair® V）及热启动Taq DNA聚合酶（如UNICON® HotStart），确保高特异性扩增。
无RNase水：用于反应体系配制。
技术参数
灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或单拷贝DNA。
动态范围：标准曲线线性范围达6个数量级（10^1–10^7拷贝/μL）。
特异性：熔解曲线分析确保扩增产物单一性，避免非特异性峰干扰。
稳定性：预混液在4℃下可稳定保存24小时，-20℃保质期24个月。
操作流程
反应体系配制（以20 μL为例）：
2×预混缓冲液 10 μL
酶混合液 1 μL
引物（10 μM）各0.4 μL
RNA模板 ≤5 μL
无RNase水补至20 μL。
反应程序：
反转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 5分钟
PCR扩增：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，信号采集）。
数据分析：
定量检测：通过标准曲线计算病毒载量（Ct值-log浓度线性拟合）。
定性判定：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤30；样本Ct≤35判为阳性。
注意事项
样本要求：RNA需避免反复冻融，建议使用DNase预处理。
污染控制：分装试剂，避免气溶胶污染。
适用机型：兼容Rox/No Rox荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
应用场景
病毒检测：如HIV、流感病毒、SARS-CoV-2等RNA病毒。
科研验证：基因表达分析、病毒载量监控。
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