溶血性曼氏杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 溶血性曼氏杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mannheimia haemolytica Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3588 |
产品概述
本试剂盒为染料法荧光定量PCR检测试剂，专用于溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）的核酸定性或定量分析。采用SYBR Green等染料法检测原理，通过特异性引物扩增靶标DNA序列，结合实时荧光信号监测，实现高灵敏度、高特异性的检测。适用于科研用途，不可用于临床诊断。
产品参数
规格：50T/盒（20μL反应体系/次）
检测方法：染料法荧光定量PCR
灵敏度：可达100拷贝/反应
线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级（如10^1–10^6拷贝/μL）
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月
运输条件：低温运输
产品特点
即开即用：预混优化试剂，仅需提供样品DNA模板。
高特异性：引物基于溶血性曼氏杆菌保守序列设计，避免与其他微生物交叉反应。
灵敏度高：可检测低至数百拷贝的靶标DNA。
双重功能：支持定性与定量分析，标准曲线需用户自行稀释制备。
防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。
试剂盒组成
2×qPCR MagicMix：含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液及荧光染料（棕色管，500μL）。
荧光PCR专用模板稀释液（黄盖，1mL）。
溶血性曼氏杆菌特异性引物混合物（白盖，100μL）。
阳性对照：非传染性DNA片段（需按说明书稀释）。
使用方法
标准曲线制备（示例：10^1–10^6拷贝/μL）
标记6支离心管（1–6号），每管加入45μL模板稀释液。
取5μL阳性对照（初始浓度10^8拷贝/μL）加入6号管，震荡混匀，得到10^7拷贝/μL标准品。
依次10倍梯度稀释至10^1拷贝/μL（操作需在独立区域，避免污染）。
PCR反应体系（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| 无核酸酶水 | 6 |
扩增程序
预变性：95℃, 3分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环；
溶解曲线分析（可选）：60–95℃，每0.5℃递增。
注意事项
实验分区操作，避免交叉污染。
阳性对照需单独稀释，严禁直接加入反应体系。
若需定量检测，需同步运行标准曲线。
废弃物需按生物安全规范处理。
质量控制
阴性对照：建议设置无模板对照（NTC）以监测污染。
重复性：建议每个样品至少重复2次。
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