产品概述
本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于灰马杜拉分枝菌（Madurella grisea）的快速、高灵敏度检测。适用于科研实验，不可用于临床诊断。
产品名称 | 灰马杜拉分枝菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Mycobacterium griseum Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3489 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供DNA模板，操作简便。
高特异性：针对灰马杜拉分枝菌保守序列设计引物，无交叉反应。
高灵敏度：检测限可达几百拷贝/反应。
一管式检测：闭管操作避免污染，兼容常见荧光定量PCR仪。
稳定性强：-20℃保存，有效期12个月。
规格及成分
| 成分 | 包装规格 | 备注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 预混PCR反应体系 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于阳性对照稀释 |
| 灰马杜拉分枝菌引物混合物 | 100 μL（白盖） | 特异性引物及探针 |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | 非活体DNA片段 |
| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
运输与保存
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。
保存条件：-20℃避光保存，有效期1年。
自备试剂
DNA模板
10×ROX校正染料（根据机型需求，详见手册）。
使用方法
1. 阳性对照稀释（示例：10²~10⁷拷贝/μL梯度）
标记6管离心管（7至2号），每管加45 μL稀释液。
取5 μL阳性对照（10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得10⁷拷贝/μL梯度。
依次梯度稀释至2号管（10²拷贝/μL），每次更换枪头。
2. PCR反应体系（20 μL/反应）
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
DNA模板：2 μL
ROX（可选）：按仪器要求添加
ddH₂O：补至20 μL
3. 扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 荧光采集 | 60℃ | 30 sec | |
注意事项
阳性对照稀释需在独立区域操作，避免污染。
反应体系需避光配制，防止荧光淬灭。
实验废弃物需按生物安全规范处理。
质量控制
阴性对照：无模板对照（NTC）应无扩增曲线。
阳性对照：Ct值≤30表明试剂盒有效。
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