小鼠促黄体生成激素(LH)ELISA试剂盒
产品原理:
试剂盒采用双抗体夹心法,基于酶联免疫吸附检测技术。预先包被的抗小鼠LH抗体与样本中的LH结合,再加入生物素标记的检测抗体,形成“固相抗体-LH-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,与生物素结合。加入显色底物TMB,颜色深浅与LH浓度成正比,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),绘制标准曲线计算样本浓度。
英文名称 | Mouse LH ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A115529 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.3125ng/mL | 检测范围 | 0.625ng/mL-20ng/mL |
主要参数
灵敏度:通常为0.5-0.75mIU/mL。
检测范围:1-50mIU/mL或0.31-20ng/mL。
特异性:可特异性检测小鼠LH,与其他相关蛋白无明显交叉反应。
精密度:板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。
适用样本
适用于小鼠血清、血浆、细胞培养上清液、组织裂解液等生物液体样本。

操作步骤
标准品稀释:按说明书进行梯度稀释。
加样:设置空白孔、标准孔和样本孔,加入相应液体。
温育:封板后37℃温育,使抗体与抗原充分结合。
洗涤:多次洗涤去除未结合物质。
加酶标抗体:加入HRP标记的抗体,避光温育。
显色:加入显色底物,避光显色。
终止:加入终止液终止反应。
测定:酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算浓度。
注意事项
样本处理:避免溶血和反复冻融,确保样本质量。
试剂保存:试剂盒需在2-8℃避光保存,避免污染。
操作规范:使用一次性枪头,避免交叉污染;加样时避免触及孔壁。
安全防护:操作时佩戴防护设备,避免接触有害试剂。
应用领域
生殖内分泌研究:研究LH在生殖周期、排卵等过程中的作用。
疾病研究:探讨LH在多囊卵巢综合征、性腺功能减退等疾病中的机制。
如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途:仅供科研实验使用,不可用于临床诊断。
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染,确保实验结果准确。
关键字: 小鼠促黄体生成激素; LH;ELISA试剂盒;
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