小鼠簇集蛋白(CLU)ELISA试剂盒
实验原理:
试剂盒采用双抗体夹心法。预先包被CLU捕获抗体的微孔板依次加入标准品和待测样本,样本中的CLU与固相抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,催化底物TMB显色,颜色深浅与CLU浓度正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本中的CLU浓度。
英文名称 | Mouse CLU ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A106811 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 9.4ng/mL | 检测范围 | 18.8ng/mL-1,200ng/mL |

试剂盒组成
预包被抗体的酶标板:用于固相抗体的固定。
标准品:已知浓度的CLU溶液,用于绘制标准曲线。
生物素标记的检测抗体:与CLU结合。
HRP标记的链霉亲和素:催化显色反应。
显色底物(TMB):在HRP作用下显色。
终止液:终止显色反应。
洗涤液:用于洗涤未结合的试剂。
样本稀释液:用于稀释待测样本。
检测范围与灵敏度
检测范围:通常为0.156-10ng/mL或15.63-1000pg/mL。
灵敏度:最低检测浓度为12.8pg/mL或9.38pg/mL。
操作步骤
准备试剂和样本:按说明书准备试剂,处理样本。
加样:将标准品和样本加入酶标板孔中。
温育:在指定温度下孵育,使抗体-抗原充分结合。
洗涤:洗去未结合的试剂,减少背景干扰。
加酶标抗体:加入生物素标记的检测抗体和HRP标记的链霉亲和素。
显色:加入TMB底物,避光孵育显色。
终止反应:加入终止液,终止显色。
读数:使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。
计算:根据标准曲线计算样本中的CLU浓度。
注意事项
样本处理:血清、血浆需离心处理,避免反复冻融。
试剂保存:试剂盒需按说明书保存,避免失效。
操作规范:使用一次性吸头,避免交叉污染;严格按步骤操作,确保结果准确性。
适用范围
本试剂盒适用于科研领域,用于检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液及相关生物液体中的CLU浓度,不适用于临床诊断。
如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途:仅供科研实验使用,不可用于临床诊断。
操作规范:严格按照说明书操作,避免交叉污染,确保实验结果准确。
关键字: 小鼠簇集蛋白 ;CLU;ELISA试剂盒;
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