小鼠多巴胺转运体(DAT)ELISA试剂盒
产品简介:
实验原理
试剂盒采用双抗体夹心法。将捕获抗体包被在微孔板上，加入标准品或样本，使DAT与抗体结合。随后加入生物素标记的检测抗体，形成免疫复合物。加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）结合物，与生物素结合。加入底物TMB后显色，颜色深浅与DAT浓度正相关。通过酶标仪测定吸光度（OD值），绘制标准曲线，计算样本中DAT的浓度。
英文名称 | Mouse DAT ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A115394 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.625ng/mL | 检测范围 | 1.25ng/mL-40ng/mL |
适用样本
适用于小鼠的血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关生物液体样本。
试剂盒组成
ELISA酶标板：预包被捕获抗体的微孔板。
标准品：已知浓度的DAT标准品。
生物素化抗体：用于检测DAT的生物素标记抗体。
酶结合物：HRP标记的链霉亲和素。
洗涤液：用于洗涤反应板。
底物溶液：TMB显色液。
终止液：终止显色反应的酸性溶液。
操作步骤
标准品稀释：按说明书稀释标准品，得到不同浓度的标准溶液。
加样：在酶标板孔中加入标准品或样本，随后加入生物素化抗体，温育后洗涤。
加酶结合物：加入HRP标记的链霉亲和素，温育后洗涤。
显色：加入底物溶液，温育避光显色。
终止：加入终止液，终止显色反应。
测定：使用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值。
注意事项
样本处理：避免溶血和高血脂样本，离心去除颗粒。
试剂保存：试剂盒保存于2-8℃，避免冻结。
操作规范：严格按说明书操作，避免交叉污染。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
科研用途：仅供科研实验使用，不可用于临床诊断。
操作规范：严格按照说明书操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。
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