产品特点
高灵敏度：可检测低至单拷贝的DNA分子，扩增效率达10^9–10^10。
特异性强：采用优化引物设计，避免非特异性扩增。
操作简便：预混反应体系（含染料），仅需添加模板DNA和引物即可使用。
无需复杂设备：兼容常规荧光定量PCR仪，无需探针法专用通道。
稳定性高：-20℃保存条件下性能稳定，适合长期储备。
产品名称 | 鲑鱼立克次氏体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Piscirickettsia salmonis Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3505 |
实验步骤
1. 样品制备
提取待测样本DNA（建议使用柱式提取法，确保纯度）。
DNA模板浓度建议为10–100 ng/μL，避免抑制剂残留。
2. 反应体系配制（以20μL为例）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× qPCR预混液（含染料） | 10 |
| 正向引物（10 μM） | 0.8 |
| 反向引物（10 μM） | 0.8 |
| DNA模板 | 2 |
| 无核酸酶水 | 至20 |
3. PCR程序设置
| 步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95 | 5 min | 1 |
| 变性 | 95 | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸* | 60 | 30 sec | |
| 荧光信号采集（SYBR通道） | 60 | 30 sec | |
*注：退火温度可根据引物Tm值优化（建议范围55–65℃）。
结果分析
扩增曲线：阈值循环数（Ct值）≤35视为阳性。
熔解曲线：单一峰表明特异性扩增；多峰提示引物二聚体或污染。
注意事项
避免反复冻融试剂，分装后使用。
实验环境需无核酸污染，推荐在超净台操作。
阴性对照（无模板）和阳性对照（已知浓度DNA）需同步检测。
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关键字： 鲑鱼立克次氏体;染料法荧光定量;PCR试剂盒;
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