产品介绍：
产品名称 | 小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse OPG ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A105411 |
检测方法：采用双抗体一步夹心法或竞争法，具有高灵敏度和特异性。
检测范围：通常为62.5-4000pg/ml，实际范围以说明书为准。
灵敏度：一般为37.5pg/ml，实际灵敏度以说明书为准。
种属反应性：专为小鼠设计，与其他物种无交叉反应。
样本类型：适用于血清、血浆、细胞培养上清液、组织裂解液等生物液体样本。
试剂盒组成
预包被微孔板：96孔或48孔，已包被捕获抗体。
酶标二抗：辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的二抗。
标准品：已知浓度的骨保护素标准品，用于绘制标准曲线。
样品稀释液：用于稀释样本，减少非特异性干扰。
洗涤缓冲液：含吐温-20的磷酸盐缓冲液，用于洗去未结合物质。
封闭液：常用牛血清白蛋白或脱脂奶粉溶液，降低背景干扰。
底物溶液：如TMB（HRP）或对硝基苯磷酸酯（AP）。
终止液：如稀硫酸或氢氧化钠溶液，用于终止酶促反应。
板封膜：防止蒸发和污染。
说明书：详细的操作步骤、试剂保存条件、注意事项等。
操作步骤
准备试剂和样本：平衡试剂至室温，按说明书准备样本。
加样：设空白孔、标准孔和待测样品孔，加入相应试剂。
温育：封板后置37℃温育30分钟。
洗涤：揭掉封板膜，弃去液体，每孔加满洗涤液，重复洗涤5次。
显色：加入显色剂A液和B液，避光显色。
终止：加入终止液，终止酶促反应。
测定：用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。
计算：根据标准曲线计算样本中骨保护素的浓度。
注意事项
样本处理：避免溶血和反复冻融，确保样本清澈透明。
试剂保存：按说明书保存，避免污染和变质。
操作规范：严格按步骤操作，避免交叉污染，确保实验结果准确。
试剂与样本准备阶段：
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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