产品介绍:

检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法。将纯化的HBsAg包被于微孔板,加入样本后,样本中的HBsAb与固相HBsAg结合。随后加入HRP标记的抗小鼠IgG抗体,形成“固相抗原-抗体-酶标抗体”复合物。加入底物TMB显色,颜色深浅与HBsAb浓度正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算抗体浓度。
产品名称 | 小鼠抗人乙型肝炎病毒表面抗原抗体(HBsAb)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse HBsAb ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A117704 |
主要参数
灵敏度:通常为15.6 IU/mL-1000 IU/mL。
特异性:可特异性检测小鼠HBsAb,与其他抗体无交叉反应。
精密度:板内和板间变异系数均<10%。
适用样本
适用于小鼠血清、血浆及相关液体样本。

操作步骤

标准品稀释:按说明书进行梯度稀释。
加样:设置空白孔、标准孔和样本孔,加入相应液体。
温育:封板后37℃温育。
洗涤:多次洗涤去除未结合物质。
加酶标抗体:加入HRP标记的抗体,避光温育。
显色:加入显色底物,避光显色。
终止:加入终止液终止反应。
测定:酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算浓度。
注意事项

样本处理:避免溶血和反复冻融,确保样本质量。
试剂保存:试剂盒需在2-8℃避光保存,避免污染。
操作规范:使用一次性枪头,避免交叉污染;加样时避免触及孔壁。
安全防护:操作时佩戴防护设备,避免接触有害试剂。
应用领域

疫苗研究:评估乙肝疫苗在小鼠中的免疫效果。
免疫监测:检测小鼠对乙肝病毒的免疫应答。
疾病模型:研究乙肝病毒感染的小鼠模型。
保存与有效期
保存条件:2-8℃。
有效期:6个月。
试剂与样本准备阶段:

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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