产品介绍：
产品名称 | 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse BDNF ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A105141 |
检测原理
双抗体夹心法：微孔板预先包被抗小鼠BDNF的抗体，加入标准品和样本后，再加入生物素标记的抗BDNF抗体和HRP标记的链霉亲和素，形成免疫复合物。加入显色底物（如TMB）后，产生颜色变化，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中BDNF浓度与OD值成正比，通过标准曲线计算得出。
适用样本
可检测小鼠的血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物液体。
试剂盒组成
预包被抗体的酶标板、标准品、生物素标记抗体、HRP标记的链霉亲和素、显色底物（如TMB）、终止液、洗涤液等。
检测性能
灵敏度：可检测低至18.75 pg/mL的BDNF浓度。
特异性：不与结构类似的其他因子交叉反应。
重复性：板内和板间变异系数均小于15%。
操作步骤
设置标准品孔和样本孔，加入相应液体。
依次加入抗体和酶标试剂，温育并洗涤。
加入显色底物，反应后加入终止液。
使用酶标仪测定OD值，绘制标准曲线，计算样本浓度。
信息
试剂盒需在2-8℃保存，有效期一般为6个月。
实验前需平衡至室温，避免反复冻融。
操作需严格按说明书进行，避免交叉污染。
试剂与样本准备阶段：
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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