产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发,专用于禽结核分枝杆菌(Mycobacterium avian)的快速、高灵敏检测。适用于科研、临床及兽医领域的定性或定量分析,具有高特异性和广谱仪器兼容性。
产品名称
禽结核分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Mycobacterium avium subsp. avium Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3543
技术参数
检测原理:通过优化引物靶向禽结核分枝杆菌保守序列,结合荧光染料实时监测扩增信号。
灵敏度:最低检测限为100拷贝/反应。
线性范围:定量检测时覆盖至少5个数量级(需标准曲线支持)。
反应体系:50次×20μL反应。
适用仪器:ABI系列、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等主流荧光定量PCR仪。
运输与保存
运输条件:低温运输(-20℃冰袋或干冰)。
保存条件:-20℃避光保存,有效期12个月。
自备试剂
样品DNA模板(纯度A260/A280建议1.8~2.0)。
10×ROX校正染料(根据仪器型号选择,详见操作指南)。
操作流程
样本处理:提取待测样本DNA。
反应配制:按说明书比例混合试剂、引物、DNA模板及对照。
PCR扩增:
预变性:95℃ 2分钟。
循环阶段:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40~45循环)。
数据分析:
定量检测:通过标准曲线计算样本拷贝数。
定性检测:
阳性:Ct值≤35,且扩增曲线呈典型S型。
阴性:Ct值≥40。
可疑(35<Ct<40):需重复检测确认。
质量控制
阳性对照:需显示典型扩增曲线且Ct≤30。
阴性对照:Ct值应≥40或无扩增。
注意事项
避免反复冻融试剂,分装后使用。
操作时需严格分区(样本处理区、PCR配制区、扩增区)以防污染。
若用于定量分析,建议每个样本设3次技术重复。
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