pH荧光探针Protonex 红色 670-乳胶微珠偶联物

产品介绍

Protonex™ Red 670-乳胶微球偶联物具有独特的pH依赖性荧光特性。与大多数传统荧光染料（通常在碱性pH下荧光增强）不同，该微球在酸性条件下荧光强度显著升高。这一特性使其成为研究吞噬作用及其受药物或环境因素调控的理想工具。微球在细胞外仅显示微弱荧光，无需洗涤步骤，特别适合活细胞成像。可高效标记吞噬体、溶酶体和内体等酸性细胞区室，并发出明亮的红色荧光。可与绿色荧光染料（如GFP、Fluo-8、钙黄绿素或FITC标记抗体）联用，实现多功能细胞分析。与Cy5相似，可直接使用常规Cy5滤光片组，无缝整合至现有实验体系

操作步骤

1.根据需要准备细胞。例如，以10 7细胞/ mL Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）制备粒细胞，向聚丙烯管中加入100μL。

注意：应单独评估每个细胞系，以确定佳细胞密度。

2.向试管中加入1-10μL的Protonex Red 670-Latex珠缀合物，并在37°C轻轻摇动孵育30分钟。

注意：应单独评估每个细胞系，以确定佳孵育时间。

3.准备一个相同的样品，在4°C下孵育作为对照。

4.孵育30分钟结束时，通过加入2mL冰冷的HHBS终止吞噬作用。混合，然后用冷HBSS洗涤细胞2次。

5.将细胞重悬于 500 μL 冷 HBSS 中，将样品保持在 4°C，并立即使用配备 Cy5 滤光片组的荧光显微镜进行分析。

注意：对于荧光酶标仪，检测Ex/Em = 640/680 nm（cutoff= 660 nm）处的荧光强度。