布氏罗得西亚锥虫染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测布氏罗得西亚锥虫（Trypanosoma brucei rhodesiense）的保守基因序列，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。试剂盒采用预混式设计，包含引物、反应缓冲液及阳性对照，实现高灵敏度、高特异性的一管式检测，避免交叉污染。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，无需单独配制反应体系。

高特异性：引物针对布氏罗得西亚锥虫保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限为100–1000拷贝/反应（不同存在差异）。

操作简便：一管式反应设计，减少操作步骤和污染风险。

兼容性：支持20 μL反应体系，适配主流荧光定量PCR仪。

规格与成分

反应次数：50次（20 μL/反应）。

核心组分：

预混PCR缓冲液（含荧光染料）

布氏罗得西亚锥虫特异性引物混合物

荧光PCR专用模板稀释液

阳性对照（非传染性DNA片段）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

实验流程

样品准备：提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

标准曲线制备（定量检测需选做）：

使用试剂盒提供的阳性对照，按10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL）。

稀释需在独立区域操作，避免污染。

PCR反应体系配制：

按比例混合预混液、引物及模板DNA。

上机检测：

程序设置：预变性（95℃, 2 min）→ 循环阶段（95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40次）。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算目标基因拷贝数。

注意事项

适用范围：仅限科研，不可用于临床诊断。

污染控制：实验分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）及阳性对照。

运输与存储：低温运输（干冰或冰袋），-20℃长期保存，避免反复冻融。

常见问题

灵敏度差异：不同因引物设计和反应体系优化不同，灵敏度可能介于100–1000拷贝/反应。

探针法与染料法区别：染料法成本较低，探针法特异性更高（需根据实验需求选择）。

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