产品组成
核心成分：
10× PCR缓冲液
dNTP混合液（2 mM）
特异性引物对（10 pM/μL）
Taq DNA聚合酶（2 U/μL）
逆转录酶（用于RNA模板的cDNA合成）
DNA模板稀释液（可选）
辅助材料：
阳性对照（1×10^7 拷贝/μL，用于验证实验有效性）
超纯水（ddH2O）
使用手册
实验原理
本试剂盒基于荧光定量RT-PCR技术，通过染料法（如SYBR Green）检测奥利华斯病毒RNA。实验分为两步：
逆转录（RT）：将病毒RNA逆转录为cDNA。
荧光定量PCR：通过扩增cDNA并实时监测荧光信号，定量分析病毒载量。
产品名称
奥利华斯病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Orungo Virus Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3582
操作步骤
1. 反应体系配制（冰上操作）
在0.5 mL离心管中依次加入：
10× PCR缓冲液：5 μL
dNTP混合液：4 μL
正向引物：2 μL
反向引物：2 μL
Taq酶：1 μL
RNA模板：1 μL（50 ng–1 μg）
补ddH2O至50 μL
2. PCR扩增程序
预变性：93℃ 3–5分钟
循环阶段（30–35次）：
变性：93℃ 40秒
退火：58℃ 30秒
延伸：72℃ 60秒
终延伸：72℃ 7分钟
3. 结果分析
通过荧光阈值（Ct值）定量病毒RNA拷贝数。
电泳验证：取5–10 μL产物进行琼脂糖凝胶电泳（需氯仿抽提石蜡油（如使用））。
注意事项
引物处理：干粉需短暂离心后以165 μL超纯水溶解，-20℃保存。
阴性/阳性对照：每批次实验需设置以排除污染或假阴性。
灵敏度：检测下限为100拷贝/反应。
特异性：引物针对奥利华斯病毒保守区设计，无交叉反应。
应用领域
病毒检测：快速诊断奥利华斯病毒感染。
科研分析：病毒载量定量、基因表达研究。
保存与运输
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输方式：冰袋或干冰运输。
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