产品介绍：
产品组成
酶标包被板：预包被FABP4抗体的微孔板。
标准品：含已知浓度FABP4的冻干品。
酶标抗体：HRP标记的FABP4抗体。
洗涤液：用于洗涤反应板。
底物液：TMB显色液。
终止液：硫酸溶液。
其他试剂：样本稀释液、封板膜等。
产品名称 | 小鼠脂肪酸结合蛋白4(FABP4)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Mouse FABP4 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A115723 |
实验原理
采用双抗体夹心法。将FABP4抗体包被在微孔板上，加入样本和酶标抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。加入底物TMB显色，颜色深浅与FABP4浓度正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度，计算浓度。
检测范围与灵敏度
检测范围：通常为31.25-2000pg/mL。
灵敏度：可检测低浓度的FABP4，具体数值请参考产品说明书。
适用样本
可用于血清、血浆、细胞培养上清液等液体样本的检测。
操作步骤
准备试剂和样本：将试剂盒各组分平衡至室温，制备样本和标准品。
加样：在酶标板孔中加入标准品、样本和相关试剂。
温育：37℃温育30分钟，使抗原抗体充分反应。
洗涤：洗去未结合的物质，避免干扰。
加酶标抗体：加入酶标记的抗体，再次温育。
再次洗涤：洗去多余的酶标抗体。
显色：加入底物液，避光显色一定时间。
终止反应：加入终止液终止显色反应。
读数：使用酶标仪测定各孔吸光度，根据标准曲线计算样本中的FABP4含量。
注意事项
样本处理：避免溶血、污染和反复冻融。
试剂使用：严格按照说明书操作，避免使用其他厂家的试剂替换。
洗涤步骤：充分洗涤，避免假阳性结果。
结果解读：每次实验需做标准曲线，确保结果准确。
储存条件
未开封试剂盒：按各组分标签所示保存，通常标准品和酶标记抗体需-20℃保存，其他试剂4℃保存。
开封后试剂盒：剩余试剂按标签保存，酶标板需干燥密封于-20℃。
试剂与样本准备阶段：
温度平衡（最容易被忽视的点）
操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。
后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。
样本处理
避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。
离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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