基本描述
产品名称:重组乳酸脱氢酶(LDH)
规格或纯度:生物活性,重组,ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,≥90%(SDS-PAGE),≥420U/mg enzyme powder
应用:Microbial metabolism in diverse environments, Pyruvate metabolism
产品介绍:
Lactate Dehydrogenase (LDH) 是一种以 NAD⁺或 NADP⁺为受体、作用于供体 CH-OH 基团上的氧化还原酶,可以催化 D-乳酸氧化生成丙酮酸。D-Lactate dehydrogenase 广泛存在于细菌和真菌中,常用于生化研究。
用途
用于谷草转氨酶,谷丙转氨酶等试剂的研发和大量配制。
酶学性质
来源:微生物
分类:EC 1.1.1.28
分子量:45 kDa (SDS-PAGE)
等电点:4.5
Km 值:2.2×10⁻⁶M (丙酮酸)
抑制剂:Ag⁺,Hg²⁺
最适 pH:6.5-7.0 图 1
最适温度:45℃ 图 2
pH 稳定性:5.5-10.0 (25℃, 16 h)
热稳定性:50℃以下稳定 (pH 7.0, 30 min)
稳定性:-25~-15℃静置保存 12 个月保持90%以上活性
保护剂:BSA





活性测定方法
原理

反应消耗的NADH可用分光光度计在 340 nm检测。
酶活定义
单位酶活定义为在下述条件下,每分钟氧化1 μmol NADH 所需的酶量。
试剂准备
试剂 I:称取0.04 g丙酮酸钠,用0.1 M, pH 7.7 Tris-HCl缓冲液溶解并定容至100 mL。
试剂 II:称取2.11 g CAPS,用80 mL水溶解, 用NaOH调节pH至9.7,加入120 mg NADH, 用双蒸水定容至100 mL。
酶稀释液:10 mM, pH 7.0磷酸钾缓冲液,并 加入BSA至终浓度0.1%。
样品:用预冷的酶稀释液将酶稀释至1-2 U/mL。
操作步骤
4.1 向1 mL比色皿中加入1 mL试剂I,20μL待 测样品,混匀。
4.2 将反应混合物在37℃预热5 min。
4.3 向反应混合物中加入0.2 mL试剂 II,混匀,37℃反应,并用分光光度计在340 nm下,记录1 min内的吸光度变化(∆As)
*用酶稀释液替代酶液,其它步骤相同,所得溶液吸光度为空白吸光度(ΔAb)
∆A=∆As-∆Ab
活力计算

1.22:反应液总体积(mL);
0.02:酶液体积(mL);
1.0:光路长度 (cm);
df:稀释倍数;
C:酶浓度( mg/mL);
6.22:标准反应条件下,生色基团在340 nm处毫摩尔吸光系数(cm 2/μmol)。
生物活性:≥420U/mg enzyme powder
Accession #:Q8CN22
预测分子量:45 kDa (SDS-PAGE)
级别:生物活性, 重组, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™
产品规格参数
浓度:≥420U/mg enzyme powder
储存温度:避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件:超低温运输
稳定性与储存:Store at -25~-15℃ (24 months). Upon delivery aliquot. Avoid freeze/thaw cycle. Store in the dark. Desiccated.
CAS编号和信息:9028-36-8
酶学委员会编号:EC 1.1.1.28
单位定义:在下述条件下,每分钟氧化 1 μmol NADH 所需的酶量。
功能和特点
Accession #:Q8CN22
生物活性:≥420U/mg enzyme powder
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