小鼠转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒
实验原理:
试剂盒通过双抗体夹心法进行检测。预先包被捕获抗体的微孔中依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体，经温育和洗涤后，加入底物TMB显色。颜色深浅与样品中的TGF-β2浓度正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
英文名称 | Mouse TGF-β2 ELISA Kit | 产品类别 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A115468 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 15.625pg/mL | 检测范围 | 31.25pg/mL-1000pg/mL |
试剂盒组成
微孔酶标板：8×12条或8×6条（根据规格不同）。
标准品：不同浓度梯度的TGF-β2标准品。
样本稀释液：用于样本的适当稀释。
检测抗体-HRP：HRP标记的检测抗体。
洗涤缓冲液：用于洗板，去除未结合的物质。
底物A和B：TMB显色液，用于显色反应。
终止液：用于终止显色反应。
封板膜：用于封住反应孔。
说明书：提供详细的操作步骤和注意事项。
操作步骤
准备试剂盒：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温平衡后使用。
设置孔板：设置标准品孔和样本孔，加入相应体积的标准品或样本。
加入检测抗体：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体，封板膜封住反应孔，37℃温育60分钟。
洗涤：弃去液体，拍干，每孔加满洗涤液，静置后甩去洗涤液，重复洗板5次。
显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。
终止反应：每孔加入终止液50μL，在15分钟内测定各孔的OD值。
性能指标
灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。
检测范围：7.5 pg/mL – 240 pg/mL。
注意事项
样本处理：避免溶血和反复冻融，确保样本质量。
试剂准备：所有试剂需在使用前达到室温，并按说明书稀释。
操作规范：严格按照规定的时间和温度进行温育，避免交叉污染。
结果解读：以标准品的OD值绘制标准曲线，代入方程计算样品浓度。
适用样本
血清：全血标本经离心处理，取上清液。
血浆：使用EDTA或肝素作为抗凝剂，离心后取上清。
组织匀浆：组织剪碎后，用PBS匀浆，离心取上清。
细胞培养物上清：离心去除颗粒，取上清液。
保存条件
未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期6个月。
开封后试剂：剩余试剂按标签所示保存，酶标板需加干燥剂密封保存。
如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
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