大鼠爱帕琳肽(APLN)ELISA试剂盒
产品简介:
大鼠爱帕琳肽(APLN)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织、细胞上清液及其他相关生物液体中爱帕琳肽(Apelin, APLN)含量的科研工具。
英文名称 | Rat APLN ELISA | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A117439 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 62.5pg/mL | 检测范围 | 125pg/mL-8,000pg/mL |
检测原理
试剂盒通常采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。其基本流程为:
微孔板预包被抗大鼠Apelin蛋白的捕获抗体;
加入待测样本或标准品,样本中的Apelin与捕获抗体结合;
加入HRP标记的检测抗体,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”复合物;
洗涤后加入TMB底物显色,颜色由无色变为蓝色,再在酸性条件下变为黄色;
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本中Apelin的浓度。

样本类型与处理
可检测的样本类型包括:
血清:全血室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟,取上清;
血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,采集后30分钟内离心取上清;
组织匀浆:组织剪碎后加生理盐水或PBS研磨,离心取上清;
细胞上清液:离心去除颗粒后使用;
其他生物液体:如脑脊液、胸腹水等。
试剂盒性能参数
项目 参数
检测范围 15.6–1000 pg/mL(不同品牌略有差异)
灵敏度 最低可检测5.62–50 pg/mL
特异性 不与其它结构类似物交叉反应
精密度 批内CV < 10%,批间CV < 12%
线性范围 血清、血浆样本稀释至1:2~1:16仍具良好线性
回收率 血清中约83%,EDTA血浆中约91%
保存条件与有效期
保存温度:2–8℃冷藏保存,避免反复冻融;
有效期:一般为6个月(以产品标签为准)。
注意事项
样本应避免溶血和细菌污染;
使用前需平衡至室温;
不同批次试剂不可混用;
仅用于科研,不可用于临床诊断。
如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存,使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染,建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用,不可用于临床诊断。
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