产品介绍:

大鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中IL-12含量设计的科研产品,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),具备高灵敏度、高特异性和良好的重复性。
产品名称 | 大鼠白介素12(IL-12)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat IL-12 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116457 |
核心原理
预先包被抗大鼠IL-12抗体的微孔板,样本中的IL-12与抗体结合,再加入HRP标记的检测抗体,形成免疫复合物。
洗涤后加入显色底物TMB,颜色深浅与IL-12浓度成正相关。
450nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算样品中IL-12浓度。

主要特点

检测范围宽:通常为15.625-1000pg/ml,灵敏度可达9.375pg/ml(不同品牌/批次略有差异)。
高特异性:与其它细胞因子无交叉反应,准确检测目标蛋白。
重复性好:板内、板间变异系数均小于10%,结果稳定可靠。
应用广泛:适用于大鼠IL-12在免疫、炎症、肿瘤、神经科学等基础研究领域的表达水平检测。
操作流程简要

样本准备:血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等适当处理并稀释。
加样:标准品和样本分别加入微孔板,设空白对照。
温育:37℃孵育30-60分钟。
洗板:弃去液体,洗涤5次。
加检测抗体:生物素化抗IL-12抗体,37℃孵育30分钟。
加酶结合物:HRP标记链霉亲和素,37℃孵育30分钟。
显色与终止:TMB显色,加终止液。
读数:450nm测定OD值,依据标准曲线计算浓度。
注意事项

避免样本反复冻融,不可检测含的样品。
试剂盒组分需按说明书规范使用和保存。
严格遵守操作步骤及仪器校准,确保结果准确
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
关键字: 大鼠白介素12; IL-12;ELISA试剂盒;
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