派琴虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

派琴虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品用途

专用于科研领域派琴虫（Perkinsus spp.）的荧光定量PCR检测，基于染料法（如SYBR Green）原理，适用于病原体核酸的定性与定量分析。

产品组分

| 编号 | 成分 | 规格/含量 | 包装标识 |

| 试剂一 | 2×染料法qPCR预混液 | 500 μL（含dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green等） | 绿色盖 |

| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄色盖 |

| 试剂三 | 派琴虫通用染料法qPCR引物混合液 | 100 μL（针对派琴虫保守区设计） | 白色盖 |

| 试剂四 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL | 黄色管 |

| 试剂五 | 参比染料（50X） | 100 μL（兼容主流荧光定量PCR仪） | 棕色管 |

| - | 使用手册 | 1份 | - |

注：

参比染料（试剂五）适用于ABI、Agilent、Bio-Rad等仪器，无需根据机型调整浓度。

需自备样品DNA、RNase-free水及ROX（仅部分ABI仪器需添加）。

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

避免反复冻融：建议分装后使用。

使用方法

1. 标准曲线制备（以10²~10⁷拷贝/μL为例）

阳性对照需在独立区域梯度稀释（10倍系列稀释），避免交叉污染。

2. 反应体系（20 μL）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×染料法qPCR预混液 | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| 参比染料（50X） | 0.4 |

| 模板DNA | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

注：若使用需ROX的仪器（如ABI 7500），替换参比染料为2 μL 10×ROX。

3. PCR程序

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃递增5秒。

注意事项

特异性：引物针对派琴虫高度保守区设计，但需通过熔解曲线验证扩增特异性。

假阴性控制：建议每批次实验包含阳性对照。

适用性：仅限科研使用，不适用于临床诊断。

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