柏氏血矛线虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 柏氏血矛线虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Haemonchus placei Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3806 |
产品概述
柏氏血矛线虫(Haemonchus placei)是一种主要寄生于牛、羊等反刍动物真胃内的线虫,可引起宿主贫血、消瘦甚至死亡。本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术,专为检测和定量分析样本中的柏氏血矛线虫核酸而设计,适用于科研用途。
技术原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术:
特异性引物针对柏氏血矛线虫基因组中的高度保守区域(如ITS区域或线粒体基因)设计
SYBR Green染料可非特异性结合所有双链DNA,在PCR扩增过程中随产物积累而荧光信号增强
仪器实时监测荧光信号变化,通过Ct值(循环阈值)判断样本中是否含有目标核酸
通过标准曲线可计算初始模板拷贝数,实现定量分析
产品规格
规格:50次反应(50T)
保存条件:-20℃避光保存
有效期:12个月
主要组分
| 组分名称 | 规格 | 主要功能 |
| 2×SYBR qPCR Mix | 500μL-1mL | 含Taq酶、dNTPs、缓冲液、Mg²⁺等 |
| PCR引物混合液 | 100μL | 特异性扩增柏氏血矛线虫目标片段 |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 含目的基因片段的质粒或DNA |
| 模板稀释液 | 1mL | 用于稀释阳性对照或溶解DNA模板 |
产品特点
高灵敏度:可检测低至10³拷贝/μL的标准品
操作简便:预混液设计,减少操作步骤
稳定性好:-20℃保存12个月性能稳定
兼容性强:适用于多种荧光定量PCR仪
操作流程
样本DNA制备
使用自选方法纯化样本DNA
设置阳性对照和阴性对照
短期保存于2-8℃,长期保存于-70℃(避免反复冻融)
PCR反应体系配置(20μL体系)
2×SYBR qPCR Mix:10μL
引物混合液:2μL
模板DNA:8μL
总计:20μL
扩增程序
预变性:95℃ 5分钟
扩增循环(40个循环):
95℃ 15秒
60℃ 30秒(采集荧光信号)
熔解曲线分析:60-95℃,每0.5℃增加,停留5秒
注意事项
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断
操作时需分区进行,避免交叉污染
建议使用无核酸酶耗材
反应体系配制应在冰上进行
熔解曲线分析可验证产物特异性
质量控制
阳性对照Ct值应≤30
阴性对照无扩增曲线
熔解曲线应为单一峰
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