弗朗西斯菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 弗朗西斯菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Francisella spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3811 |
产品特点
即开即用：预混优化试剂，用户仅需提供DNA模板。
高特异性：引物针对弗朗西斯菌保守序列设计，与其他病原体无交叉反应。
高灵敏度：检测下限可达100拷贝/反应。
防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。
兼容性：适配常见荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断
试剂盒组成
| 成分 | 编号 | 包装规格 | 保存条件 |
| 2×qPCR MasterMix | FC-MM | 500 μL（棕盖） | -20℃避光 |
| 荧光染料预混液 | FC-Dye | 1 mL（蓝盖） | 4℃避光 |
| 弗朗西斯菌引物混合液| FC-Primer| 100 μL（白盖） | -20℃ |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）| FC-PC | 50 μL（红盖） | -80℃ |
| 无核酸酶水 | FC-H₂O | 1 mL（透明） | 室温 |
实验步骤
1. 样本处理
提取待测样本DNA（推荐浓度≥10 ng/μL）。
阳性对照需稀释至1×10⁴~1×10⁶拷贝/μL作为标准曲线。
2. 反应体系配制（20μL/反应）
| 组分 | 体积 |
| 2×qPCR MasterMix | 10 μL |
| 引物混合液 | 0.8 μL |
| 荧光染料 | 0.5 μL |
| 模板DNA | 2 μL |
| 无核酸酶水 | 6.7 μL |
3. PCR程序设置
预变性：95℃ 3 min
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃升温5 sec
数据分析
阈值设定：取指数扩增期荧光信号显著上升点。
阳性判定：Ct值≤35且熔解曲线为单一峰。
阴性对照：应无扩增曲线（Ct值≥40或无信号）。
注意事项
操作需在无菌环境下进行，避免核酸污染。
试剂解冻后需涡旋混匀，短暂离心后使用。
阳性对照与样本需分区域操作，防止交叉污染。
长期保存请分装，避免反复冻融。
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关键字： 弗朗西斯菌通用;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;