旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 旋毛虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Trichinella spiralis Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3824 |
包装规格
检测次数：50次/盒
主要成分及规格：
试剂一（PCR MagicMix 3.0）：1 mL（红盖）
试剂二（超纯水）：1 mL（亮黄色）
试剂三（引物混合液）：100 μL（白盖）
试剂四（阳性对照，1×10^8 拷贝/μL）：50 μL（黄盖）
说明书：1份
检验原理
采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对旋毛虫属（Trichinella spp.）基因保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测。
储存条件及有效期
储存温度：-20℃±5℃，避光保存；
运输条件：冰袋（2~8℃）；
反复冻融次数：≤7次；
有效期：12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 系列（如7500、StepOnePlus）
MX3000P/3005P
LightCycler（Roche）
Bio-Rad（CFX系列）
Eppendorf（Mastercycler ep realplex）
自备耗材与设备
无核酸酶的1.5 mL离心管、0.2 mL PCR反应管；
滤芯吸头（10 μL、200 μL、1000 μL）；
离心机、振荡混合器、移液器。
样品要求
样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（参考《临床微生物样本采集规范》）；
保存条件：
短期：-20℃；
长期：-70℃（≤6个月）；
运输：2~8℃冰袋，避免反复冻融。
操作步骤
1. 阳性对照稀释（独立操作区）
标记6管（7~2号），每管加45 μL模板稀释液；
7号管加5 μL阳性对照（1×10^8 拷贝/μL），震荡混匀，得1×10^7 拷贝/μL标准品；
依次10倍稀释至1×10^2 拷贝/μL。
2. PCR反应体系配制（样本处理区）
按比例混合试剂引物混合液及模板DNA；
分装至反应管，避免气泡。
3. 上机检测
设置扩增程序：预变性（95℃, 2 min）→循环阶段（95℃ 15 s→60℃ 30 s，40循环）；
采集荧光信号（FAM通道）。
注意事项
阳性对照需单独操作，避免污染；
不同批号试剂不可混用；
实验分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）需严格隔离。
质量控制
阳性对照：Ct值≤30；
阴性对照：无扩增曲线；
无效结果需复检。
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