产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术,专用于检测传染性脾肾坏死病病毒(ISKNV)核酸,适用于科研用途(非临床诊断)。其特点包括:
高特异性:基于病毒保守序列设计引物,无交叉反应。
高灵敏度:检测限可达数百拷贝/反应。
便捷性:即开即用,含预混反应体系,减少操作步骤。
防污染设计:一管式闭管检测,避免扩增产物污染。
产品名称 | 传染性脾肾坏死病病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus (ISKNV) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3715 |

试剂盒组成

| 成分编号 | 成分名称 | 规格 | 包装特征 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 500 μL | 棕色管 |
| 试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |
| 试剂三 | ISKNV PCR引物混合物 | 100 μL | 白盖 |
| 试剂四 | ISKNV PCR阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL | 红盖 |
| 试剂五 | DNA病毒裂解液(试用装) | 9 mL(15次) | - |
| 试剂六 | 使用手册 | 1份 | - |
注:需自备DNA模板及10×ROX(依机型需求)。
样本处理

液体样本:
取2-3 mL样本,13,000 rpm离心3分钟,弃上清。
沉淀中加入50 μL DNA抽提液混匀,100℃裂解10分钟,离心后取5 μL上清用于PCR。
运输与保存:
样本需低温运输,-20℃保存(有效期1年),避免反复冻融。
阳性对照需单独存放,防止污染。
PCR反应体系及程序
反应体系(20 μL):
2×qPCR MagicMix:10 μL
引物混合物:0.4 μL
模板DNA:5 μL
稀释液补足至20 μL。
扩增程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 92℃ | 5分钟 |
| PCR循环(30次) | 94℃ | 60秒 |
| | 50℃ | 60秒(信号采集) |
| | 72℃ | 60秒 |
荧光检测参数:
染料:最大激发/发射波长分别为500 nm/530 nm(结合DNA后)。
注意事项

实验分区操作,避免气溶胶污染。
试剂保存于-20℃,避免反复冻融。
本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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