产品介绍:

大鼠骨成型蛋白9(BMP-9)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液及其他生物样本中BMP-9蛋白浓度的科研试剂产品。该试剂盒基于双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理设计,具有高灵敏度与特异性,检测结果与样本中BMP-9浓度呈正相关。
产品名称 | 大鼠骨成型蛋白9(BMP-9)elisa试剂盒 | 英文名称 | RatBMP-9 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129683 |
核心参数概览
项目 内容
检测方法 双抗体夹心法(一步法)
种属反应性 大鼠
样本类型 血清、血浆(EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝)、细胞上清、组织匀浆等
检测范围 通常为12.5 pg/mL – 800 pg/mL(不同品牌略有差异)
灵敏度 最低可检测至6.25 pg/mL(部分可达1.0 pg/mL以下)
上样体积 50 μL/孔
反应时间 约2.5小时
保存条件 2–8℃冷藏保存,避免反复冻融
有效期 一般为6个月(部分长达11个月)
仅供科研使用 不适用于临床诊断

工作原理简述

微孔板预包被抗BMP-9捕获抗体;
加入待测样本或标准品,BMP-9与固相抗体结合;
洗涤后加入HRP标记的检测抗体,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物;
再次洗涤,加入TMB底物显色,反应终止后在450 nm波长下读取吸光度(OD值);
通过标准曲线计算样本中BMP-9浓度。
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点

ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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