弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Campylobacter spp. Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3840
预期用途
本试剂盒用于体外定性检测临床样本(如粪便、食品样本等)中的弯曲杆菌(Campylobacter spp.)核酸，适用于临床辅助诊断、食品安全检测等领域。
检验原理
本试剂盒采用TaqMan荧光探针技术，针对弯曲杆菌特异性基因序列设计引物和探针。PCR扩增过程中，Taq酶5'→3'外切酶活性将探针水解，使报告基团与淬灭基团分离产生荧光信号，通过实时监测荧光信号变化实现对靶基因的定量检测。
主要组成成分
PCR反应液(含dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等)
热启动Taq DNA聚合酶
弯曲杆菌特异性引物探针混合液
阳性对照(弯曲杆菌DNA)
阴性对照(无核酸酶水)
ROX参比染料(部分机型需要)
储存条件及有效期
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期12个月。
适用仪器
ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等常见实时荧光定量PCR仪。
样本要求
粪便样本：取新鲜粪便约1g，加入适量PBS缓冲液混匀后离心取上清
食品样本：25g样品加入225mL缓冲蛋白胨水均质后增菌培养
DNA提取建议使用商品化核酸提取试剂盒
检验方法
反应体系配制(20μL)：
PCR反应液 10μL
酶混合液 2μL
引物探针混合液 3μL
模板DNA 5μL
PCR反应程序：
预变性：95℃ 5min
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 1min，45个循环
结果判读
Ct值≤35且扩增曲线呈S型：阳性
Ct值>35或无扩增曲线：阴性
阳性对照Ct值应在20-30之间，阴性对照无扩增
性能指标
灵敏度：≤100拷贝/反应
特异性：不与沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等常见肠道菌交叉反应
重复性：CV≤5%
注意事项
本试剂仅用于体外诊断
实验分区操作，避免污染
废弃物需按生物危险品处理
不同批次试剂组分不可混用
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