产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法,整合反转录(RT)与定量PCR(qPCR)于单管反应体系,适用于RNA和DNA模板的高灵敏度检测。通过优化缓冲体系及耐热酶组合,可实现快速、精准的核酸定量,避免开盖污染风险,适配主流荧光定量PCR仪。
产品名称
通用染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Universal Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3724
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 规格(20 T) | 规格(200 T) |
| A | 2× Advanced SG Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |
| B | UH Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| C | RNase-free H₂O | 250 μL | 2×1.25 mL |
性能参数
灵敏度
RNA模板:高表达靶标(0.1 pg)、中等表达靶标(1 pg);病毒RNA可检测至E2拷贝。
DNA模板:单拷贝级别检测。
重复性:低浓度样本90复孔CV值<5%。
精准度:可分辨2倍浓度差异的模板。
稳定性:预混液4℃保存24小时性能无显著变化。
适用样本及仪器
样本类型:动植物组织、细胞、微生物核酸(RNA/DNA)。
仪器兼容性:支持No Rox/Low Rox/High Rox平台,适配国内外主流荧光定量PCR仪。
操作流程
反应体系配制(以20 μL为例):
2× SG Buffer 10 μL
Enzyme Mix 0.8 μL
引物各0.4 μM
模板RNA/DNA ≤500 ng
RNase-free H₂O补至20 μL。
程序设置:
反转录:50℃ 15分钟(RNA模板需此步骤)。
预变性:95℃ 5分钟。
扩增:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(40循环)。
熔解曲线分析:60℃~95℃(0.5℃/秒)。
注意事项
标准曲线制备需独立操作区,避免气溶胶污染。
阳性对照为无传染性DNA片段,严禁活病毒操作。
定量检测线性范围≥5个数量级(如10²~10⁷拷贝/μL)。
储存与运输
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:冰袋或干冰运输。
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