大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒
产品简介:
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清及相关液体样本中基质金属蛋白酶3(MMP-3)含量而设计的科研工具,广泛应用于炎症、组织重塑、肿瘤转移及纤维化等疾病机制研究。
英文名称 | Rat MMP-3 ELISA Kit | 产品类别 | Rat/大鼠Elisa试剂盒 |
货号 | A116524 | 规格 | 48T/96T |
灵敏度 | 0.15625ng/mL | 检测范围 | 0.3125ng/mL-10ng/mL |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预包被MMP-3抗体的微孔板中加入标准品或待测样本,MMP-3与抗体结合后,再加入HRP标记的检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤后加入TMB显色液,HRP催化TMB生成蓝色产物,终止反应后变为黄色,颜色深浅与MMP-3浓度成正比。用酶标仪在450nm波长测定吸光度,通过标准曲线计算样品浓度。

主要组成
预包被抗体微孔板
MMP-3标准品
HRP标记检测抗体
TMB显色液
终止液
洗涤缓冲液
样品稀释液
样本处理与保存
血清/血浆/组织匀浆/细胞上清:按说明书离心取上清,避免溶血和高血脂;样本可分装保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融
保存条件:试剂盒2-8℃冷藏保存,标准品-20℃保存,有效期约6个月
试剂盒特点
灵敏度高:最低检测限可达0.1~0.1875 ng/mL(不同品牌有所差异)
特异性强:不与其它结构类似物交叉反应
重复性好:板内和板间变异系数均小于15%
操作简便:试剂盒组分齐全,预包被微孔板,无需自行包被抗体
注意事项
严格按说明书操作,避免污染
洗涤要充分
避免标本溶血
不用于临床诊断,仅用于科研
如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):
稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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注意事项
试剂盒组分应按说明储存,使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染,建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用,不可用于临床诊断。
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