检测原理
本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，针对草鱼呼肠孤病毒2型（GCRV-2）的特异性保守序列设计引物，通过实时荧光信号扩增曲线定量检测病毒RNA。
产品名称
草鱼呼肠孤病毒2型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Grass Carp Reovirus Type 2 (GCRV-2) Dye-based qRT-PCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3733
产品特点
高灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应的病毒RNA。
高特异性：引物经优化设计，与相近病毒无交叉反应。
便捷性：即开即用，用户仅需提供病毒RNA模板。
兼容性：支持定性与定量检测，定量线性范围达5个数量级。
安全对照：提供无传染性的DNA片段作为阳性对照（非活体样本）。
试剂盒组分
| 成分 | 规格/数量 |
| qRT-PCR缓冲液 | 500μL |
| RT-PCR酶混合液 | 50μL |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1mL |
| 引物干粉 | 50T |
| 阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50μL |
操作步骤
1. 标准曲线制备（以10^1~10^6拷贝/μL为例）
取6支离心管，分别加入45μL模板稀释液。
梯度稀释阳性对照：首管加入5μL原液（10^7拷贝/μL），依次稀释至10^6~10^1拷贝/μL。
2. 反应体系配制
每20μL反应体系包含：
10μL缓冲液
0.5μL酶混合液
1μL引物干粉（复溶后）
2μL模板RNA
6.5μL无核酸酶水
3. PCR程序设置
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 3分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）
注意事项
实验需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。
阳性对照需与其他组分分开放置，稀释操作使用带滤芯枪头。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
检测结果仅用于科研，临床诊断需结合其他方法验证。
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