检验原理
本试剂盒基于SYBR Green I荧光染料法，针对小蛇菌属高度保守基因区域设计特异性引物，通过实时荧光定量PCR技术对目标核酸进行扩增检测。反应过程中释放的荧光信号由仪器实时监测，实现定性或定量分析。
产品名称 | 小蛇菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Serpula spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3738 |
试剂组成
小蛇菌属通用预混反应液（含SYBR Green I、dNTPs、Taq酶等）
小蛇菌属特异性引物混合液
阳性质控品（无传染性DNA片段，1×10^8拷贝/μL）
阴性质控品（无核酸酶水）
说明书
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（建议分装），有效期12个月。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等）。
自备耗材与设备
无核酸酶离心管（0.2mL PCR管、1.5mL EP管）
滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）
离心机、涡旋振荡器、移液器
样品要求
样本类型：环境样本（如土壤、水体）、临床分离培养物等。
采集与保存：避免交叉污染，短期保存于-20℃，长期保存需-70℃以下（避免反复冻融）。
运输：2~8℃冰袋运输，严禁高温暴露。
使用方法
样本处理（需在洁净区操作）：
按标准方法提取DNA，建议使用柱式核酸提取试剂盒。
阳性对照无需处理，阴性质控品直接使用。
PCR反应体系配制（冰上操作）：
每20μL反应体系含：预混反应液10μL、引物混合液2μL、模板DNA 2μL、无核酸酶水补足至20μL。
扩增程序（以ABI 7500为例）：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）；
熔解曲线分析：60~95℃（每0.5℃递增，持续5秒）。
结果判读：
定量分析：通过标准曲线（10^2~10^7拷贝/μL梯度稀释）计算样本浓度。
定性分析：
阳性：Ct值≤35，且熔解曲线峰值单一；
可疑：35<Ct<40，需重复检测；
阴性：Ct值≥40或无扩增曲线。
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断或食品检测。
实验需分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
不同批号组分不可混用，反应液解冻后需彻底混匀。
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