产品介绍:

大鼠激肽释放酶3(PSA)ELISA试剂盒是专为定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液及细胞培养上清等样本中激肽释放酶3(PSA)浓度设计的科研产品,广泛应用于癌症、生殖医学、内分泌及前列腺相关疾病等研究领域。
产品名称 | 大鼠激肽释放酶3(PSA)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat PSA ELIS |
规格 | 48T/96T | 货号 | A116639 |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法ELISA原理:
酶标板微孔预先包被抗PSA特异性抗体;
样本中的PSA与抗体结合,再加入生物素标记的检测抗体,形成免疫复合物;
随后加入HRP标记的链霉亲和素,与生物素结合;
洗涤后加入TMB显色底物,HRP催化TMB产生颜色反应,颜色深浅与PSA浓度正相关;
在450 nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样本中PSA的浓度。

主要参数

检测范围:常见为0.20-12.5 ng/mL,灵敏度可达0.09 ng/mL以下
特异性:仅针对激肽释放酶3(PSA),与其他类似物质无明显交叉反应
样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物标本
精密度:批内和批间变异系数通常小于10%-12%
保存条件:2-8℃冷藏保存,避免反复冻融,有效期一般为6个月至1年
操作步骤(简要)
试剂盒及样本平衡至室温
设置标准品孔和样本孔,分别加入标准品或待测样本
37℃孵育1-2小时,抗原抗体充分结合
洗涤酶标板,去除未结合物质
加入酶标检测抗体,37℃继续孵育30-60分钟
洗涤后加入TMB显色,避光反应10-20分钟
加终止液,酶标仪450 nm读数,绘制标准曲线并计算浓度
注意事项

避免样本溶血和反复冻融,样本如不能立即检测建议分装-20℃保存
试剂盒仅供科研使用,不用于临床诊断
不同批号试剂不可混用,所有试剂使用前需摇匀
洗涤过程需彻底,避免交叉污染和板内干燥
显色底物TMB需避光保存,使用前配制
试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
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ELISA试剂盒的主要优点
ELISA之所以被广泛应用,主要归功于以下几个核心优势:
灵敏度高(抓得准):
它利用酶的催化放大作用,能将微弱的信号放大,因此可以检测到样本中极低浓度的目标物质(甚至达到皮克级 pg/mL)。哪怕样本里只有微量的病毒、激素或蛋白质,它也能“捕捉”到。
特异性强(瞄得准):
基于抗原-抗体的特异性结合原理,试剂盒中的抗体通常只与目标物质反应,很少受样本中其他杂质的干扰。这大大降低了假阳性率,结果准确可靠。
操作简便且快速:
相比于一些复杂的仪器分析方法,ELISA的操作流程相对标准化。市面上的试剂盒通常是一套完整的组件,按照说明书进行加样、孵育、洗板、显色即可。整个过程通常在几小时内就能完成。
高通量与适用性广:
它通常采用96孔板或48孔板,一次实验可以同时处理几十个样本,非常适合大规模的流行病学筛查或批量科研实验。此外,它不仅能测蛋白,还能测抗体、激素、药物残留甚至农药,应用领域覆盖了医学、食品安全和环境监测。
安全稳定:
不像放射免疫法那样使用放射性同位素,ELISA使用的是酶标记,对人体和环境无辐射危害,且试剂保存时间较长。
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