尼氏单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Haplosporidium nelsoni Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR3850
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光PCR技术，针对尼氏单孢子虫（Haplosporidium nelsoni）基因高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现对目标核酸的定性和定量分析。
试剂组成
预混PCR Master Mix（含SYBR Green染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶等）
尼氏单孢子虫特异性引物
阳性对照（标准品）
阴性对照（无核酸酶水）
其他辅助试剂（如缓冲液、DEPC-H2O等）
保存条件与有效期
保存温度：-20℃以下避光保存
有效期：12个月
使用方法
样本DNA提取
使用兼容的核酸提取试剂盒或自选方法提取纯化样本DNA。
标准曲线制备（定量检测适用）
将阳性对照梯度稀释（建议5个数量级，如10^7~10^3拷贝/μL），用于建立标准曲线。
每个稀释步骤需更换枪头，避免交叉污染。
PCR反应体系配制
按20μL/反应配制体系，包含预混Master Mix、引物、模板DNA及对照。
荧光定量PCR程序
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40个循环
熔解曲线分析：60℃~95℃，逐步升温（验证扩增特异性）
性能参数
灵敏度：可达几百拷贝/反应
特异性：与相近病原体无交叉反应
线性范围：定量检测时覆盖至少5个数量级
注意事项
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
操作需分区进行（样本制备区、PCR扩增区），避免污染。
试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。
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