羊痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 羊痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Capripoxvirus Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3881 |
检验原理
基于染料法荧光定量PCR技术，针对羊痘病毒保守序列设计特异性引物，通过检测荧光信号定量病毒DNA拷贝数。特点包括：
高灵敏度：检测限低至100~几百拷贝/反应。
高特异性：引物经优化，避免与其他病原体交叉反应。
即开即用：预混反应体系（含2×qPCR MagicMix、引物、阳性对照等）。
双重用途：支持定性和定量分析，线性范围达5个数量级（10^1~10^6拷贝/μL）。
试剂盒组成
| 成分 | 规格/包装 | 备注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 含荧光染料、dNTPs、酶等 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 用于标准品稀释 |
| 病毒特异性引物混合液 | 100 μL（白盖） | CpHV-1或CpHV-2专一设计 |
| 阳性对照（无传染性） | 50 μL（红盖） | 1×10^7~10^8拷贝/μL |
| DNA病毒裂解液（试用）| 9 mL（15次） | 可选，用于样本前处理 |
| 使用手册 | 1份 | 含操作流程及数据分析方法 |
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 系列（如7500、StepOnePlus）
安捷伦（MX3000P/3005P）
Roche LightCycler
Bio-Rad（CFX系列）
Eppendorf Mastercycler
使用方法
1. 标准曲线制备（以10倍梯度稀释为例）
标记6管（6~1号），每管加45 μL稀释液。
6号管加5 μL阳性对照（1×10^7拷贝/μL），震荡混匀得10^6拷贝/μL标准品。
依次稀释至10^1拷贝/μL（每步换枪头）。
2. PCR反应体系（20μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| ROX校正染料（可选）| 0.4 |
| ddH₂O | 补至20 |
3. 反应程序
预变性：95℃ 3分钟
循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光）
注意事项
分区操作：标准品稀释需在独立区域完成，避免污染。
质量控制：每批实验需包含阴性对照（无模板对照）和阳性对照。
临床限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。
数据解读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型视为阳性。
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