伴放线放线杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒专为伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans）的荧光定量PCR检测设计，采用染料法技术，具有高特异性、灵敏度和操作便捷性，适用于科研用途。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：基于保守序列设计的引物，可避免与其他微生物的交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式反应体系，减少气溶胶污染风险。

标准化配置：每盒支持50次20μL体系的荧光定量PCR检测。

试剂盒组成

预混PCR Master Mix（含荧光染料）

阳性对照（标准品）

阴性对照

使用说明书

自备试剂与仪器

DNA模板（待测样本）

10×ROX参比染料（根据机型需求选用）

荧光定量PCR仪

微量移液器及无菌吸头

操作步骤

反应体系配制：

在冰上按以下比例配制反应液（20μL/反应）：

预混Master Mix：10μL

引物混合液：2μL

DNA模板：1μL（50ng–1μg）

ddH2O补足至20μL

短暂离心混匀。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 3–5分钟

循环扩增（35 cycles）：

变性：95℃ 40秒

退火：58℃ 30秒

延伸：72℃ 60秒

终延伸：72℃ 7分钟

数据分析：

定量检测时，以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，通过样本Ct值推算目标DNA浓度。

保存与运输

运输条件：低温运输（-20℃冰袋）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

注意事项

实验前确保工作台清洁，使用无核酸酶耗材。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融。

加样顺序需一致，避免交叉污染。

废弃反应管需按生物危害废物处理。

适用范围

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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